Plasma cholinesterase activity as an environmental impact biomarker in juvenile green turtles (Chelonia mydas) / Atividade da colinesterase plasmática como biomarcador de impacto ambiental em tartarugas verdes juvenis (Chelonia mydas)

The objective of this study was to evaluate the enzymatic activity of plasma cholinesterase in Chelonia mydas marine turtles belonging to two populations, according to their capture sites, under the absence and probable influence of anthropic effects. A total of 74 animals were used and later divided into two groups, based on the capture site. Blood samples were collected from all captured animals, which were then released into the sea at the site of capture. A descriptive statistical analysis of the plasma cholinesterase activity values and an analysis comparing these values based on the capture site were performed. Samples of heparinized plasma from animals captured at the two different sites were analyzed. Plasma cholinesterase activity ranged from 121 to 248U/L, with a mean and standard deviation of 186.1±30.68U/L. When comparing plasma cholinesterase activity values in individuals based on the capture site, a significant difference was observed. Establishing reference values for different sea turtle populations is necessary to interpret future sampling results and to allow sea turtles to be used as sentinels of ecosystem health. Future studies are needed to evaluate other populations and the activity of plasma cholinesterase in juvenile marine turtles, in relation to environmental contamination.(AU)

O objetivo desse estudo foi avaliar a atividade enzimática da colinesterase plasmática em tartarugas marinhas da espécie Chelonia mydas em duas populações de acordo com o local de captura, sob ausência e provável influência de efeito antrópico. Foi utilizado um total de 74 animais e posteriormente divididos em dois grupos de acordo com o local de captura. Foram coletadas amostras de sangue de todos os animais capturados e em seguida liberados ao mar no mesmo local. Foi realizada uma análise estatística descritiva dos valores da atividade plasmática de colinesterase do total de animais e análise comparando os valores de acordo com o local de captura. Foram analisadas amostras de plasma heparinizado de animais capturados em dois locais distintos. Os valores da atividade plasmática de colinesterase variaram de 121 a 248U/L, com média e desvio padrão de 186.1±30.7U/L. Quando comparados os valores de atividade plasmática da colinesterase nos indivíduos de acordo com o local de captura, foi observada diferença significativa. O estabelecimento de valores de referência para diferentes populações de tartarugas marinhas são necessários para interpretar os futuros resultados amostrais e permitir que as tartarugas marinhas sejam usadas como sentinelas da saúde do ecossistema. Estudos futuros são necessários para avaliar outras populações e a atividade da colinesterase plasmática de tartarugas marinhas juvenis em relação à contaminação ambiental.(AU)

Plasma biochemistry values in wild female hawksbill turtle (Eretmochelys imbricata) during nesting in Mexican coast / Valores de bioquímica plasmática em tartaruga de pente (Eretmochelys imbricata) durante a época de desova na costa mexicana

To obtain plasma biochemistry values, blood was collected for 47 nesting females of apparently healthy Eretmochelys imbricata sea turtles using sodium heparin as an anticoagulant. Blood samples were collected in April-Jun for two years (nesting season). Hematologic characteristics, including packed cell volume, white blood cell counts, red blood cell count and hemoglobin level; and plasma chemistry values, including creatinine, blood urea nitrogen, uric acid, triglyceride, total cholesterol, and glucose were measured. The data generated from this study may be useful for clinical assessment of health and disease of wild hawksbill sea turtles on nearshore habitats in the Gulf of Mexico, thus contributing to a conservation of this species.(AU)

Para obter valores da bioquímica plasmática, foram coletadas amostras de sangue durante a desova de 47 tartarugas marinhas fêmeas aparentemente saudáveis da espécie Eretmochelys imbricata, utilizando heparina sódica como anticoagulante. Amostras de sangue foram coletadas durante dois anos entre os meses de abril e junho (época de nidificação). Mediu-se os parâmetros hematológicos (incluindo hematócrito, contagem de glóbulos brancos e vermelhos e nível de hemoglobina) e os valores da bioquímica plasmática (incluindo creatinina, ureia, ácido úrico, triglicérides, colesterol total e glicose). Os dados gerados a partir deste estudo podem ser úteis para a avaliação clínica de saúde e de doença em tartarugas-de-pente em habitats próximos ao litoral no Golfo do México, contribuindo para a conservação dessa espécie.(AU)

Refractometry as an alternative to the biuret method for measuring total serum proteins in Podocnemis expansa (Podocnemididae) and Phrynops geoffroanus (Chelidae) / Refratometria como alternativa ao método do biureto para mensuração de proteínas séricas totais em Podocnemis expansa e Phrynops geoffroanus (Podocnemididae, Chelidae)

Total serum protein is a significant indicator of health condition in animals. The aim of this study was to analyze the precision of the portable refractometer in determining the concentration of total serum proteins in Podocnemis expansa and Phrynops geoffroanus. A total of 26 animals were used. The blood samples were collected from the supraoccipital sinus and stored in tubes without anticoagulant. Total serum protein was determined using both the biuret reaction and refractometry. The total serum protein mean concentration (g dL-1) with biuret method and refractometry for P. expansa were 3.16 and 3.2; and for P. geoffroanus were 3.56 and 2.72, respectively. These results indicate that total serum protein values can be determined with precision in P. expansa and P. geoffroanus using a portable refractometer.

A proteína sérica total é um indicador significativo do estado de saúde em animais. O objetivo desse estudo foi analisar a precisão do refratômetro portátil para determinar a concentração de proteínas séricas totais em Podocnemis expansa e Phrynops geoffroanus. Foram utilizados um total de 26 animais. As amostras de sangue foram coletadas por punção do seio supraoccipital e armazenadas em tubos sem anticoagulante. A concentração de proteína sérica total foi determinada utilizando tanto a reação de biureto como um refratômetro portátil. A média da proteína sérica total (g dL-1) pela reação de biureto e pela refratometria para P. expansa foram de 3,16 e 3,2; e para P. geoffroanus foram de 3,56 e 2,72, respectivamente. Estes resultados indicam que os valores de proteínas séricas totais podem ser determinados com precisão em P. expansa e P. geoffroanus usando o refratômetro portátil.

Biometria corporal e parâmetros hematológicos de Trachemys scripta elegans e Trachemys dorbignyi (Testudines: Emydidae) criadas em cativeiro em Petrolina, Pernambuco / Body biometry and hematological parameters of Trachemys scripta elegans and Trachemys dorbignyi (Testudines: Emydidae) reared in captivity in Petrolina/PE, Brazil

Este estudo objetivou avaliar a biometria corporal e o perfil hematológico de Trachemys scripta elegans (N=28) e de Trachemys dorbignyi (N=22) criadas em cativeiro na região do submédio do Vale do São Francisco, semiárido nordestino brasileiro, visando estabelecer valores sanguíneos básicos de saúde e gerar dados úteis na fisiologia comparativa de Testudines. Após 120 dias de adaptação e jejum de 24 horas, 2,5 mL de sangue foram coletados do seio occipital dorsal e depositados em tubo com heparina sódica para a avaliação, na sequência, dos níveis hematologicos. A contagem total de eritrócitos (CTE) e global de leucócitos (CGL) foi realizada em câmara de Neubauer; a dosagem de hemoglobina (HGB) pelo método da método da cianometahemoglobina e o hematócrito (HCT) através da técnica do microhematócrito. A partir da CTE estabeleceram-se matematicamente os índices hematimétricos. A biometria corporal também foi avaliada: a) massa corporal (MC, g); b) dimensões máximas da carapaça [comprimento (CMC, cm) e largura (LMC, cm)];c) dimensões máximas do plastrão [comprimento (CMP, cm) e largura (LMP, cm)]; d) comprimento total da cauda (CTC, cm); e) comprimento linear da base da cauda ao orifício cloacal (CprC, cm); f) comprimento linear do orifício cloacal a extremidade da cauda(CpoC, cm). T. scripta elegans apresentaram valores maiores (P < 0,05) para a biometria corporal, enquanto que o CTC e CprC foram maiores (P<0,05) em T dorbignyi. Os níveis hematológicos não diferiram (P>0,05) entre as espécies. Os resultados demostram que a maior parte da variação observada entre T. scripta elegans e T. dorbignyi é explicada pelas variáveis biométricas e que algumas correlações hematológicas caracterizam diferenças interespecíficas. Conclui-se que os resultados lançam luz sobre valores de referência para estas espécies mantidas em cativeiro na região do semiárido e servem como um modelo para a fisiologia comparativa intra e interespécies.(AU)

This study aimed to evaluate the body biometry and hematological profile of Trachemys scripta elegans (N=28) and Trachemys dorbignyi (N=22) reared in captivity in the Brazilian submedium northeastern semi-arid region in the Valley of the São Francisco river. It aimed to establish basic health blood values and generate useful data on the comparative physiology of Testudines. After 120-day adaptation and 24-hour fasting, 2.5mL of blood were collected from the dorsal occipital sinus and deposited into a tube with sodium heparin for evaluation, following, of hematological levels. The red blood cell count (RBC) and GLC was conducted in a Neubauer chamber, the hemoglobin level (HGB) was supplied by the cyanmethemoglobin method and the hematocrit (HCT) was obtained by the microhematocrit technique. Based on the RBC, the hematimetric were mathematically established. Body biometry were also evaluated: a) body mass (BM, g); b) maximum dimensions of the carapace [length (MLC, cm) and width (MWC, cm)]; c) maximum dimensions of plastron [length (MLP, cm) and width (MWP, cm)]; d) total length of tail (TLT, cm); e) linear length from the base of the tail to the cloacal orifice (LPrC, cm); f) linear length from the cloacal orifice to the extremity of the tail (LPoC, cm). T. scripta elegans showed higher values (P<0.05) for biometrics, while TLT and LPrC were higher (P<0.05) in T. dorbignyi. The hematological values did not differ (P>0.05) among species. The results show that most of the variation found between T. scripta elegans and T. dorbignyi is explained by the biometric variables and that some hematologic correlations characterize interspecies differences. It was conclude that the results shed light on benchmarks for these species kept in captivity in the northeastern semi-arid region and serve as a model for intra and interspecies comparative physiology.(AU)

Biometria e parâmetros hematológicos em tartarugas da Amazônia de um criatório comercial de Rio Branco/AC / Biometric and haematological indices in turtles from the Amazon farm in Rio Branco/AC

Com o objetivo de definir os valores biométricos e quantificar parâmetros hematológicos como hematócrito, concentração de proteínas plasmáticas totais e leucócitos totais de tartarugas da espécie Podocnemis expansa, coletou-se um mililitro de sangue da veia femoral de 60 exemplares aparentemente saudáveis. Os animais obtidos do criatório particular, Estância Terra, localizado no estado do Acre, foram classificados em seis grupos de pesos diferentes. Durante a biometria, foram tomadas medidas de peso, comprimento e largura da carapaça e do plastrão, para as análises da correlação dos parâmetros de tamanho e massa corporal entre os indivíduos do mesmo grupo. Os valores observados indicaram que o grupo 06, que inclui os animais com massa acima de 26 kg, apresentou melhor correlação entre as massas individuais de cada animal (r = 0,97) Enquanto que, o grupo 02 (massa entre 21 e 25 kg) apresentou a pior correlação entre as massas (r = 0,34). O resultado da média total de hematócrito de todos os animais deste experimento foi de 10,56%. A concentração das proteínas plasmáticas totais foi de 3,69g dL-1, e a média de leucócitos totais foi de 51466,66µL. Estes parâmetros são considerados fora do padrão quando comparados com os valores encontrados em animais saudáveis da mesma espécie. Assim, este trabalho pode contribuir com informações sobre os dados biométricos e parâmetros hematológicos de P. expansa de cativeiro e demonstra a importância do monitoramento da sanidade dos animais em cativeiro, prevenindo manifestação de enfermidades que poderão pôr em risco a saúde de todo o plantel.(AU)

The aim of this study was defined the biometric values and quantify hematological parameters such as hematocrit, concentration of total plasma proteins and total leukocytes for Podocnemis expansa, we collect one milliliter of blood from the femoral vein of 60 specimens apparently healthy. The animals were collected from a private farm, Estancia Terra, located in Rio Branco in the state of Acre, and were classified into six groups of different weights. During the collection of biometric data, weight measurements were taken, and length and width of the carapace and plastron, for the analysis of correlation between the size parameters and body mass between individuals of the same group. The values observed indicate that the group 06, which includes animals with mass above 26kg, showed the best correlation between the individual masses of each animal (R = 0.97), while the group 02 (weight 21 to 25kg) showed the worst correlation between the mass (r = 0.34). The result of the overall average hematocrit of all animals of this experiment was 10.56%. The concentration of total plasma proteins was 3,69g DL-1 and the average total number of leukocytes was 51466,66µL. These parameters are considered abnormal when compared to the values found in healthy animals of the same species. This work contributes with information about biometric data and hematological parameters of P. expansa captivity and demonstrates the importance of monitoring health, preventing diseases that may endanger the health of all animals in the farm.(AU)

Avaliação de parâmetros bioquímicos séricos em Tartarugas-da-Amazônia (Podocnemis expansa) mantidas em cativeiro / Evaluation of serum biochemical parameters in Amazon turtles (Podocnemis expansa) hatchlings kept in captivity

Amostras de sangue de Tartaruga-da-Amazônia mantidas em cativeiro foram analisadas com o propósito de avaliar os constituintes bioquímicos séricos e de relacionar ao que já foi relatado por outros pesquisadores, além de gerar mais informações, tendo em vista a escassez de dados envolvendo a espécie estudada. Foram utilizados 35 animais, com idade entre 3 e 7 meses, os quais foram contidos fisicamente para coleta de sangue em tubo sem anticoagulante. As análises bioquímicas foram processadas através de métodos cinéticos (enzimas) e colorimétricos (demais análises), e os valores médios obtidos foram: cálcio 7,0±1,9mg/dL, fóforo 2,8±1,2mg/dL, ácido úrico 1,8±0,8mg/dL, uréia 10,4±3,9mg/dL, alanina aminotransferase (AST) 75,5±33,6 UI/L, proteína total 1,9±0,8g/dL, triglicerídeos 22,9±9,8mg/dL e colesterol 45,3±19,7mg/dL. Observou-se que os valores dos componentes séricos avaliados assemelham-se aos que foram encontrados por outros pesquisadores em estudos bioquímicos séricos com Podocnemis expansa e outras tartarugas de água doce. Importante ressaltar que, no decorrer deste estudo observou-se a escassez de dados publicados sobre parâmetros sanguíneos de tartarugas do gênero Podocnemis, especialmente a espécie Podocnemis expansa, o que corroborou a alta relevância do desenvolvimento de mais pesquisas que envolvam a questão.(AU)

Blood samples from the giant river turtle kept in captivity were analyzed in order to evaluate the serum biochemical constituents and relate to what has been reported by other researchers, beyond the purpose of generating further information, given the paucity of data involving this species. The turtle eggs were from the state of Tocantins and were obtained from direct sampling in their natural habitat. After being collected the eggs were kept in incubators and then the puppies were kept in tanks. Samples were collected after chemical restraint of these animals by intracardiac puncture or cardiocentesis. The samples were centrifuged to obtain serum. Biochemical analyzes were processed by kinetic and colorimetric methods, as described by the manufacturer, and the values obtained were: calcium 7.0±1.9mg/dL, phosphorus 2.8±1.2mg/dL, uric acid 1.8±0.8mg/dL, BUN 10.4±3.9mg/dL, alanine aminotransferase (AST) 75.5±33.6 IU/L, total protein 1.9±0.8g/dL, triglycerides 22.9±9.8mg/dL and cholesterol 45.3±19.7mg/dL. It was observed that the values of the evaluated blood components are similar to those found by other researchers in serum biochemical studies with samples of Podocnemis expansa. During this study we observed the paucity of published data on blood parameters of Podocnemis genus, especially P. expansa species, which confirmed the high relevance of the development of further research involving this topic.(AU)

Hematological and histopathological evaluation of wildlife green turtles (Chelonia mydas) with and without fibropapilloma from the north coast of São Paulo state, Brazil / Avaliação hematológica e histopatológica de tartarugas verdes de vida livre (Chelonia mydas) com e sem fibropapilomas do litoral norte do estado de São Paulo

Blood profiles were determined in 47 juvenile green turtles, Chelonia mydas, from São Paulo northern coast, Brazil. Twenty-nine were affected by fibropapillomas and 18 were tumor free. Complete gross and histopathologic examinations of the fibropapillo were performed in 21 green turtles. Biometrical data, size, location and amount of tumors were recorded. The papillomas varied in morphology, location, size, color and texture. We found hyperplastic stroma, rich in blood vessels and connective tissue with increase in thickness of the dermis. The tumors w0ere classified as papillomas or fibropapillomas according to their epithelial and/or stromal proliferation. The lowest Mean Corpuscular Hemoglobin (HCM) values were observed in affected turtles.

Realizou-se hemograma de 47 tartarugas verdes, Chelonia mydas, provenientes de uma população de vida livre do litoral do estado de São Paulo, Brasil. Dessas, 29 apresentavam fibropapilomas e 18 não apresentavam formação tumoral. Fez-se avaliação macroscópica e histopatológica dos tumores de 21 tartarugas verdes com fibropapilomatose. Foram coletados dados biométricos dos animais, avaliação de tamanho, localização e quantidade dos tumores. As formações papilomatosas apresentaram morfologia, localização, tamanho, coloração e textura variados. Observou-se um estroma hiperplásico, rico em vasos sanguíneos e grande quantidade de tecido conjuntivo, resultando em um espessamento da derme. As formações foram classificadas como papilomas e/ou fibropapilomas, dependendo da proliferação epitelial e/ou de estroma, respectivamente. Os parâmetros hematológicos apresentaram variação, em função do acometimento tumoral, somente para Hemoglobina Corpuscular Média (HCM), sendo observados valores menores em animais com fibropapilomas.

Efeito do sítio de venopunção nos parâmetros hematológicos em tigre-d'água-americano, Trachemys scripta elegans / Effect of the blood collection site on the hematological parameters in red-eared slider, Trachemys scripta elegans

O objetivo do presente estudo foi realizar a comparação entre dois sítios de coleta sanguínea em 24 exemplares de tigre-d'água-americano (Trachemys scripta elegans) oriundos de um criadouro comercial, localizado no município de Antonina, litoral do Paraná, Brasil. Os animais foram submetidos a contenção física e as venopunções foram realizadas no seio supraocciptal e na veia coccígea dorsal. As amostras heparinizadas foram identificadas e refrigeradas para posterior análise laboratorial. A contagem total de eritrócitos e leucócitos foi realizada pela técnica de hemocitometria. O hematócrito (Ht) e a hemoglobina (Hb) foram determinados pelo método de microhematócrito e cianometahemoglobina, respectivamente. A proteína plasmática total (PPT) foi determinada por refratometria e a contagem diferencial de leucócitos foi realizada através da técnica de Shilling. Houve diferença significativa no número de leucócitos e no valor da proteína plasmática total, e em ambos os casos os valores encontrados nas amostras provenientes da veia coccígea dorsal foram inferiores. A diferença encontrada no número de leucócitos provavelmente foi devido à contaminação por linfa, que também justifica o menor valor na concentração da proteína plasmática total. Conclui-se que é mais indicada a venopunção no seio supraocciptal quando comparado a veia coccígea dorsal.(AU)

The aim of the present study was to compare two different blood collection sites of 24 red-eared sliders (Trachemys scripta elegans) from a commercial breeder, situated in Antonina, Paraná, Brasil. The animals were physically restrained and paired blood samples were collected from the dorsal coccygeal vein and the occipital sinus. The samples were collected in syringes containing heparin. After collection the samples were identified and refrigerated to posterior hematological analysis. Red blood cell and white blood count were performed using a hemocytometer. The packed cell volume and hemoglobin were determined by the microhematocrit method and cyanmethemoglobin method, respectively. Total plasma protein was determined by refractometry and differential leukocyte count was performed by the Shilling technique. There was a significant difference in the total white blood cell count and on the total plasma protein value, and on both cases the results found on the samples from the dorsal coccygeal vein were lower. The difference found on the white blood cell count was probably due to the lymph contamination of the samples, which also justifies the lower values of total plasma protein. In conclusion, the occipital sinus is more recommended blood collection site than the dorsal coccygeal vein.(AU)

Flow cytometry as a tool in the evaluation of blood leukocyte function in Chelonia mydas (Linnaeus, 1758) (Testudines, Cheloniidae) / A citometria de fluxo como ferramenta para avaliar a função celular de leucócitos sangüíneos de Chelonia mydas (Testudines, Cheloniidae)

Chelonia mydas is a sea turtle that feeds and nests on the Brazilian coast and a disease called fibropapillomatosis is a threat to this species. Because of this, it is extremely necessary to determine a methodology that would enable the analysis of blood leukocyte function in these sea turtles. In order to achieve this aim, blood samples were collected from C. mydas with or without fibropapillomas captured on the São Paulo north coast. Blood samples were placed in tubes containing sodium heparin and were transported under refrigeration to the laboratory in sterile RPMI 1640 cell culture medium. Leukocytes were separated by density gradient using Ficoll-PaqueTM Plus, Amershan Biociences®. The following stimuli were applied in the assessment of leukocyte function: Phorbol Miristate-Acetate (PMA) for oxidative burst activity evaluation and Zymosan A (Saccharomyces cerevisiae) Bio Particles®, Alexa Fluor® 594 conjugate for phagocytosis evaluation. Three cell populations were identified: heterophils, monocytes and lymphocytes. Monocytes were the cells responsible for phagocytosis and oxidative burst.

Chelonia mydas é uma tartaruga marinha que freqüenta o litoral brasileiro para alimentação e nidificação e uma doença denominada fibropapilomatose é uma das mais importantes ameaças à sobrevivência dessa espécie. Desta forma, a definição de uma metodologia que permita analisar a função dos leucócitos sangüíneos torna-se extremamente necessária. Foram utilizadas amostras sangüíneas de C. mydas com e sem fibropapilomas capturadas no litoral norte do estado de São Paulo. As amostras sangüíneas foram colocadas em tubos contendo heparina sódica e transportadas em meio de cultura celular RPMI 1640 estéril e sob refrigeração. Os leucócitos foram obtidos por gradiente de densidade usando Ficoll-PaqueTM Plus, Amershan Biociences®. Os estímulos aplicados foram Miristato Acetato de Phorbol (PMA) para avaliação de burst oxidativo e Zymosan A (Saccharomyces cerevisiae) Bio Particles®, Alexa Fluor® 594 conjugate para avaliação de fagocitose. Foram identificadas três populações celulares: heterófilos, monócitos e linfócitos. Os monócitos foram as células responsáveis pela fagocitose e pelo burst oxidativo.

Valores hematológicos de tartarugas marinhas Chelonia mydas (Linaeus, 1758) juvenis selvagens do Arquipélago de Fernando de Noronha, Pernambuco, Brasil / Hematological values of juvenile wild sea turtles Chelonia mydas (Linaeus, 1758) from the Fernando de Noronha archipelago, Pernambuco State, Brazil

Foram determinados os valores hematológicos de referência para 60 tartarugas marinhas Chelonia mydas juvenis selvagens aparentemente saudáveis do Arquipélago de Fernando de Noronha, Pernambuco,Brasil nos meses de julho a setembro de 2003. Os resultados obtidos foram: Hematócrito 21,4 a 36,6 %; Hemácias 0,244 a 0,554 x106/μl; Hemoglobina 5,9 a 14,0 g/dl; Volume Corpuscular Médio 500,4 a986,1 fl; Hemoglobina Corpuscular Média 144,0 a 367,1 pg; Concentração de Hemoglobina Corpuscular Média 23,7 a 45,1 g/dl;Leucócitos 1178,8 a 8259,6 /μl; Monócitos 15,4 a 1494,3 /μl; Linfócitos221,1 a 1924,8 /μl; Heterófilos 621,5 a 4317,8 /μl; Eosinófilos 96,1 a1831,0 /μl; Basófilos 0,0 a 45,3 /μl e Trombócitos 9513,2 a36316,5 /μl. A comparação dos resultados obtidos com os dados da literatura reforça a necessidade do estabelecimento de valores hematológicos específicos para aglomerações em diferentes condições geográficas, climáticas, faixas de tamanho e diferentes metodologias. Devido a estas influências estes valores não devem ser extrapolados para outras aglomerações e devem ser usados com critério para avaliação clínica de indivíduos sob outras condições.

The hematological reference ranges of sixty wild, apparently health, juvenile green sea turtles (Chelonia mydas) from the Fernando de Noronha Archipelago, Pernambuco State, Brazil, were determined between the months of July and September of 2003. The obtained results were: Packed cell volume 21,4-36,6 %; erythrocytes count 0,244-0,554 x106/μl; Hemoglobin 5,9-14,0 g/dl; Mean Corpuscular Volume500,4-986,1 fl; Mean Corpuscular Hemoglobin 144,0-367,1 pg; Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration 23,7-45,1 g/dl; Totalleucocytes count 1178,8-8259,6 /μl; Monocytes 15,4-1494,3 /μl;Lymphocytes 221,1-1924,8 /μl; Heterophils 621,5-4317,8 /μl;Eosinophils 96,1-1831,0 /μl; Basophils 0,0-45,3 /μl; Trombocytes 9513,2-36316,5 /μl. The comparison between the obtained results and literature data reinforce the need to establish hematological counts for specific agglomerations on different geographic and climate conditions, size classes, age, and methodologies. Because of these influences, the values should not be extrapolated to other C. mydas agglomerations and should be used carefully for the clinical evaluation of individuals under other conditions.

Condiciones óptimas de cultivo de linfocitos y análisis parcial del cariotipo de la tortuga cabezona, Caretta caretta (Testudines: Cheloniidae) en Santa Marta, Caribe Colombiano

Lymphocyte culture and partial karyotype of the marine turtle Caretta caretta (Testudines: Cheloniidae) in Santa Marta, Colombian Caribbean. Over the past few years an important reduction in the number of nesting marine turtle Caretta caretta individuals has been registered in the Colombian Caribbean, raising the question of a possible extinction in the medium term. A conservation plan is needed. We studied the culture requirements for C. caretta lymphocytes and preliminary karyotype analysis for cytogenetic identification, immunological study and toxicology without the need to kill individuals. Peripheral blood samples were obtained from 47 individuals in Santa Marta, Colombia and tests were made until optimal conditions were established for lymphocyte culture. The karyotype had 56 chromosomes, 32 macrochromosomes and 24 micro-chromosomes. An ideogram showed that C. caretta has four groups of chromosomes. Sexual chromosomes were not observed. These results do not coincide with the karyotype described from the Pacific (Japan). The present study is the first to include a complete description of the chromosome morphology of turtles from the Atlantic Ocean. it is possible that one of the adaptive strategies of this species is genetic interchange with other species of the family, producing viable hybrids. individuals in this study might be viable hybrids of C. caretta and further molecular studies are needed. Rev. Biol. Trop. 56 (3): 1459-1469. Epub 2008 September 30.

En los últimos años se ha registrado una disminución importante en el número de individuos de la tortuga marina Caretta caretta anidantes en el Caribe colombiano, situación que pone en evidencia la posibilidad de su extinción a mediano plazo. Por esto, es necesario implementar planes para su manejo y conservación. En este estudio se determinaron los requerimientos del cultivo de linfocitos de Caretta caretta para la obtención de cariotipos que permitan la identificación citogenética, el estudio inmunológico y toxicológico de individuos sin necesidad de sacrificarlos. Se muestrearon 47 individuos de C. caretta de Santa Marta, Colombia obteniendo sangre periférica con la que se realizaron ensayos de las diferentes variables hasta obtener las condiciones óptimas para el cultivo convencional de linfocitos. El cariotipo obtenido presentó 56 cromosomas: 32 macrocromosomas y 24 microcromosomas. El ideograma mostró que C. caretta tiene cuatro grupos de cromosomas: el grupo A compuesto por doce (12) pares de cromosomas de mayor tamaño. El Grupo B compuesto por cuatro (4) pares de cromosomas medianos y pequeños y el Grupo C conformado por 12 pares de microcromosomas. No se observaron cromosomas sexuales. Estos resultados están en desacuerdo con el cariotipo descrito por Kamesaki (1989), debido posiblemente a que las muestras analizadas en ese estudio fueron colectadas en el Océano Pacifico (Japón). El presente estudio es el primero realizado con tortugas del Océano Atlántico que cuenta con la descripción completa de la morfología cromosómica. Es posible, que una de las estrategias adaptativas de esta especie sea el intercambio genético con otras especies de la familia, que produce individuos híbridos viables. En este aspecto se ha descrito la hibridación de tortugas Caretta caretta con Eretmochelys imbricata, Chelonia mydas y Lepidochelys kempii, esto sugiere la posibilidad que los individuos caracterizados en este estudio sean híbridos viables de C. caretta, por lo tanto, se hace necesario realizar estudios a nivel molecular.

Valores bioquímicos en sangre de la tortuga verde (Chelonia mydas) presentes en la Alta Guajira Venezuela / Blood biochemistry values of green turtle (Chelonia mydas) present in the Alta Guajira Venezuela

Las tortugas marinas han sido ampliamente investigadas y documentadas en las últimas décadas. La bioquímica sanguínea representa una valiosa herramienta diagnóstica para el monitoreo del estado de salud de la fauna silvestre El objetivo de este estudio fue determinar los valores bioquímicos en la sangre de la tortuga verde (Chelonia mydas) presente en la Alta Guajira, Venezuela. La extracción de las muestras sanguíneas se realizó de los senos cervicales dorsales en 28 ejemplares de tortugas verdes capturadas en redes y posteriormente liberadas. Fueron medidos el largo curvo del caparazón (LCC) y ancho curvo del caparazón (ACC) con una cinta métrica flexible. Se determinaron los valores bioquímicos de la sangre: proteínas totales, albúmina, fosfatasa alcalina, urea, creatinina, ácido úrico, colesterol, triglicéridos, glucosa y fósforo por colorimetría, utilizando kits comerciales; los minerales (calcio, hierro, magnesio, zinc) se determinaron por espectrofotometría de absorción y emisión (sodio, potasio). Los valores promedio fueron: 4,37 g/dL proteínas totales, 1,50 g/dL albúmina, 119,63 U/L fosfatasa alcalina, 27,60 mg/dL urea, 0,17 mg/dL creatinina, 3,36 mg/dL ácido úrico, 180,77 mg/dL colesterol, 32,24 mg/dL triglicéridos, 130,07 mg/dL glucosa, 5,20 mg/dL fósforo, 7,94 mg/dL calcio, 44,02 µg/dL hierro, 196,68 meq/L sodio, 4,75 meq/L potasio, 4,99 mg/dL magnesio y 2,11 mg/L zinc. Estos resultados se encuentran dentro de los intervalos de referencia documentados para la especie, a excepción de la fosfatasa alcalina, triglicéridos, colesterol y la urea, los cuales presentaron las mayores variaciones.

Sea turtles have been widely investigated and reviewed over the last decades. Blood biochemistry represents a valuable diagnostic tool for monitoring the health condition of wildlife. The aim of this study was to determine the blood biochemistry values of green turtles (Chelonia mydas) present in the Alta Guajira, Venezuela. Blood samples were collected of the dorsal cervical sinuses from 28 green turtles captured in gill nets. The turtles were released later. The curved carapace length (CCL) and curved carapace width (CCW) were measured with a flexible measuring tape. The following values were established using commercial kits: total proteins, albumin, alkaline phosphatase, urea, creatinine, uric acid, cholesterol, triglycerides, glucose, and phosphorus by colorimetry; the minerals were determined by emission (sodium, potassium) and absorption spectrometry (calcium, iron, magnesium, zinc). The mean values obtained were: total proteins (4.37 g/dL), albumin (1.50 g/dL), alkaline phosphatase (119.63 U/L), urea (27.60 mg/dL), creatinine (0.17 mg/dL), uric acid (3.36 mg/dL), cholesterol (180.77 mg/dL), triglycerids (32.24 mg/dL), glucose (130.07 mg/dL), phosphorus (5.20 mg/dL), calcium (7.94 mg/dL), iron (44.02 µg/dL), sodium (196.68 meq/L), potassium (4.75 meq/L), magnesium (4.99 mg/dL) and zinc (2.11 mg/L). These results fall within the reference intervals documented in this species, except for the alkaline phosphatase, triglycerides, cholesterol, and urea, which showed the largest variations.

Immunocytochemical detection of glucagon and insulin cells in endocrine pancreas and cyclic disparity of plasma glucose in the turtle Melanochelys trijuga.

The present investigation was carried out to know the seasonal variation in plasma glucose,insulin and glucagon cells during the reproductive cycle of untreated Melanochelys trijuga. Pancreatic endocrine cells were immunochemically localized.Insulin-immunoreactive (IR) cells occurred in groups of 3-20 and were in close apposition, while glucagon-IR cells were distributed individually between the exocrine pancreas or formed anastomosing cords where cells were not intimately attached. Whenever both IR cell types were present together forming an islet,insulin-IR cells formed clusters in the centre with glucagon-IR cells being scattered at the periphery. Glucagon-IR cells seemed to be secretory throughout the pancreas during the reproductive cycle,while insulin-IR cells were found to be pulsating in their secretion. Mean size of the islet was 1.306, 0.184 and 2.558 mm in the regenerative, reproductive and regressive periods,respectively. In general,insulin-IR cells measured 5.18 (mu)m and glucagon-IR cells 5.22 (mu)m in their longest axis. Invariably, glucagon-IR cells were more in number than insulin-IR cells. The fasting plasma glucose level was 69.97 mg% during the regenerative period, which increased to 97.96 mg% during the reproductive period,and reached a peak value of 113.52 mg% in the regressive period.

Inventario de la tortuga arrau, Podocnemis expansa (Schweigger, 1812) en zoológicos de Venezuela: valores referenciales del hemograma y la bioquímica sérica / Inventory of the arrau sideneck turtle, Podocnemis expansa (Schweigger, 1812) in Venezuelan zoos: haematology and blood chemistry reference values

La tortuga arrau o tortuga gigante del río Orinoco (Podocnemis expansa), es el quelonio de agua dulce de caparazón duro más grande del mundo, el cual ha sido sometido a una cacería irracional al punto de estar en peligro crítico de extinción. Entre las diversas estrategias de conservación para esta especie se ha considerado la posibilidad de incluir a algunos zoológicos bien sea logrando la reproducción que permanecen cautivos o participando en el levante de neonatos provenientes de áreas naturales para su posterior liberación. En tal sentido se realizó un inventario de los ejemplares existentes en los zoológicos, verificándose la presencia de 101 adultos (94 hembras y 7 machos). Se pudo apreciar que las exhibiciones donde son mantenidos no están diseñadas específicamente para este especie, requiriendo la mayoría de modificaciones en su infraestructura y el manejo de los ejemplares, para que puedan servir como centros de reproducción ex situ. Se extrajeron muestras de sangre de tortugas de la nuca para ser analizadas en el laboratorio, con la finalidad de obtener valores hematológicos y de química sanguínea de referencia, como un paso esencial para estimar su estado de salud. Los resultados arrojados por la observación bajo el microscopio y un analizador automático de sangre fueron: hematocrito 34,30 por ciento, eritrocitos 470 x 10 a la nueve/L, leucocitos, 3,085 x 10 a la nueve/L, linfocitos 34,00 por ciento, monocitos 1,33 por ciento, heterófilos 63,50 por ciento, proteínas totales 43,7 g/L, albúmina 19,2 g/L, globulinas 19,6 g/L, bilirrubina total 0,004 g/L, bilirrubina directa 0,001 g/L, ácido úrico 0,012 g/L, urea 0,366 g/L, glucosa 0,485 mg/L, hierro 1,088, mg/L, calcio 0,093 g/L, sodio 134,78mmol/L, potasio 4,26 mmol/L, cloro 104,38 mmol/L, fósforo 0,033 g/L, CK 1673 u/L, AST 26,50u/L, ALT 16,80 u/L, y ALP 154,60 u/L, respectivamente.

The Arrau sideneck turtle (Podocnemis expansa) is the biggest fresh water hard shell chelonian of the world, which has been subjected to an irrational hunting to the point of being in the verge of extinction. Among the diverse strategies of conservation of this species, it has been considered the possibility to employ the zoos that kept this species in their collections as ex situ breeding centers, and also for raising wild born hatchlings until one year of age for re-introduction purposes. In such a sense it was carried out an inventory of the captive zoo specimens where we counted 101 adult animals (94 females and 7 males). The inspection of the exhibits gave as a result that most of the facilities requires modifications, also in habitat conditions, animal husbandry, research and public information in order to reach mentioned aims. Blood samples were collected from the neck of some turtles, with the purpose to obtain hematological and blood chemistry reference values, as an essential step to estimate its health condition. The results obtained by the observation under microscope and a blood automatic analizer were: packed cell volume 34.30%, erythrocytes 470 x 109/L, leukocytes 3.08 x 109/L, lymphocytes 34.00%, monocytes 1.33%, heterophils 63.50%, total proteins 43.7 g/L, albumin 19.2 g/L, globulins 19.6 g/L, total bilirubine 0.004 g/L, direct bilirubin 0.001 g/L, uric acid 0.012 g/L, urea nitrogen 0.366 g/L, glucose 0.485 mg/L, iron 1.088, mg/L, calcium 0.093 g/L, sodium 134.78 mmol/L, potassium 4.26 mmol/L, chloride 104.38 mmol/L, phosphorus 0.033 g/L, CK 1673 u/L, AST 26.50 u/L, ALT (6.80 u/, and ALP 154.60 u/L),respectively.

Hemograma e determinação da proteína plasmática total de tartarugas marinhas da espécie Caretta caretta (Linnaeus, 1758), criadas em cativeiro, Praia do Forte, Município de Mata de São João – Bahia / Hematologic examination and total protein values of sea turtles of species Caretta caretta (Linnaeus, 1758), in captivity, from Praia do Forte, Mata de São João - Bahia

Com objetivo de obter valores dos parâmetros do hemograma e de proteína plasmática total, de tartarugas marinhas da espécie Caretta caretta criadas em cativeiro, foram coletados cinco mililitros de sangue através de venopunção do seio venoso cervical dorsal de oito animais daquela espécie, utilizando como anticoagulante a heparina de sódio. Os achados hematológicos mostraram valores médios de eritrócitos de 275.000/μl (±28.030,59), volume globular de 33,12% (±2,35), concentração de hemoglobina de 8,65 g/dl (±0,80), enquanto que os índices hematimétricos encontrados foram de 725 fl (± 131,99) para volume globular médio (VGM), 198,18 pg (± 38,66) para hemoglobina globular média (HGM) e de 26,10% (± 1,21) para concentração de hemoglobina globular média (CHGM). No leucograma a média do número total de leucócitos foi de 3.656/μl(±963,04), e os valores médios relativos da contagem diferencial de leucócitos foram de 59,38% (±16.27) para heterófilos, 10,38% (±6,32)para eosinófilos, 0,13% (±0.35) para basófilos, 29,25% (±17,12) para linfócitos e 0,88% (±2,10) para monócitos, sendo os valores absolutos de 2.156,87/μl (±703,49); 366,88/μl (±216,44); 2,50/μl (±7,07);1.110,94/μl (±783,61) e 19,06/μl (± 42,34), respectivamente. O valor médio de trombócitos encontrado foi igual a 10.968,13/μl (±3.109,19)e a determinação de proteína total teve uma média de 6,5 g/dl (±0,83). Das variáveis analisadas, a contagem de eritrócitos, o volume globular médio, a hemoglobina globular média e as contagens total e diferencial de leucócitos apresentaram valores diferentes para a espécie em questão, quando comparadas com a literatura consultada.

With the purpose in obtaining measurable parameters of hematologic examination and total protein test values of eight sea turtles of species Caretta caretta in captivity, 5mL of blood were collected from dorsal cervical sinus using heparin as anticoagulant. The results showed average amounts of erythrocytes of 275.000/μl (±28.030,59), packed cell volume of 33,12% (±2,35), hemoglobin concentration of 8,65g/dl (±0,80), while the erythrocytic indexes were 725 fl (± 131,99) for mean corpuscular volume (MCV), 198,18 pg (± 38,66) for mean corpuscular hemoglobin (MCH) and 26,10% (± 1,21) for mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC). The leukocyte response showed an average of WBC counting of 3.656/μl (±963,04), and the average numbers relating to the leukocyte count were 59,38%(±16.27) for heterophils, 10,38% (±6,32) for eosinophils, 0,13%(±0.35) for basophils, 29,25% (±17,12) for lymphocytes and 0,88%(±2,10) for monocytes, being those absolute values of 2.156,87/μl(±703,49); 366,88/μl (±216,44); 2,50/μl (±7,07); 1.110,94/μl(±783,61) e 19,06/μl (± 42,34), respectively. The average amount of trombocytes found equaled 10.968,13/μl (±3.109,19) and the total protein finding of an average 6,5 g/dl (±0,83). Of all variables analyzed, the erythrocytes count, the mean corpuscular volume, the mean corpuscular hemoglobin and all leukocyte counts presented different values for the relevant species when compared to published literature.